作者:袁晶; 杜晋平; 杨军; 陶恒勋真核表达c2c12细胞pcr肌肉发育
摘要:为了进一步研究细胞视黄酸结合蛋白2(cellularretinoicacid—bindingprotein2,CRABP2)基因在肌肉发育中的功能和作用机制,试验从成年小鼠肌肉组织中提取RNA。经反转录获得cDNA样本,RT—PCR扩增小鼠CRABP2基因的编码区,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中。经PCR扩增、双酶切和测序分析鉴定后提取去内毒素质粒,将其转染C2C12细胞,通过Real—timePCR检测其在C2C12细胞中的表达情况。结果表明:pcDNA3.1-CRABP2真核表达载体成功构建及其在体外细胞有效表达。
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