作者:刘薇娜 陈庆稳 王学华 王春阳 鹿炳武 孙...膜蛋白质类血清白蛋白芽孢杆菌属
摘要:目的建立细菌表面展示纳米级白蛋白的体系。方法将球形芽孢杆菌表面层蛋白编码基因sllB的3’端截短后与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)编码基因融合,5’端与链霉抗生物素蛋白(Strep—tagI)的编码基因连接,置于大肠杆菌中表达。用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS·PAGE)和蛋白质印迹法验证蛋白表达结果,并在透射电镜下测量表达产物的粒径。结果将合成的Strep—tagl/sllB1-2706bp/Gly4Ser/HSA融合基因片段测序验证后插入原核表达质粒pET28a(+)。转化宿主菌E.coliB121诱导表达后,全蛋白和不溶性蛋白样品经SDS-PAGE鉴定,在相对分子质量约166000处出现特异性条带,蛋白质印迹法表明重组蛋白可与抗His—Tag单克隆抗体结合。透射电镜下可见B121表面有大量晶格结构,平均粒径142.3nm。结论将球形芽孢杆菌表面层蛋白编码基因与HSA编码基因融合后进行原核表达获得了纳米级白蛋白,为采用基因工程方法生产纳米药物和疫苗提供了一条新途径。
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