作者：翟琨; 李奉权; 史伯安; 向东山双重猝灭分子信标凝血酶荧光定量检测
摘要：利用G碱基和有机猝灭基团对荧光基团的双重猝灭作用构建了分子信标,建立了一种基于双重猝灭原理的检测凝血酶的简单方法。此分子信标中荧光基团设计为羧基荧光素（FAM）,有机猝灭基团设计为Black Hole Quencher 1（BHQ-1）,BHQ-1连接3个含有G碱基的核苷酸,分子信标的环设计为凝血酶的核酸适配体。体系中没有凝血酶时,分子信标呈茎环结构,荧光基团FAM与有机猝灭基团BHQ-1及G碱基相互靠近,FAM的荧光在BHQ-1及G碱基的双重猝灭下,其荧光信号很弱;当体系中有凝血酶存在时,分子信标与凝血酶特异性结合,形成G-四联体结构,茎-环结构被破坏,FAM远离猝灭基团BHQ-1及G碱基,其荧光得到恢复。在最适条件下,体系的荧光强度（ΔI）与凝血酶的浓度（C）在0.4~40 nmol/L范围内具有良好的线性关系,线性回归方程为ΔI=24.63C（nmol/L）＋13.06（R~2=0.9972）,检出限为0.18 nmol/L（3σ,n=9）。实际血样加标回收率为96.3%~98.7%。
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