HI,欢迎来到学术之家,发表咨询:400-888-7501  订阅咨询:400-888-7502  股权代码  102064
0

人胱抑素C基因的克隆和原核表达

作者:周齐洋 张小燕胱抑素c基因克隆原核表达

摘要:目的:研究人胱抑素c(Cycstatin C,cysC)的原核重组表达及纯化。方法:通过RT-PCR扩增得到人CysC的cDNA序列,并将其构建到pET-32a(+)的表达载体中。通过转化人BL21(DE3)表达宿主茵及表达条件的优化,摸索其最佳表达条件。通过镍柱纯化以及DEAE—sepharoseFF离子交换层析的方法纯化得到重组的人cysC蛋白。结果:通过RT-PCR扩增的方法得到的cDNA序列通过测序证明与预期一致。通过优化表达,CysC的表达水平达到了160mg/L,约占总可溶蛋白的20%,表达产物通过两步纯化后获得了纯度为95%的重组Cys C。结论:成功构建cy8C原核表达系统和蛋白纯化系统,为下一步制备多克隆抗体以及开发Cysc的免疫诊断试剂奠定了基础。

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

放射免疫学

《放射免疫学》是一本有较高学术价值的双月刊,自创刊以来,刊载内容有基础放射免疫、临床放射免疫、放射免疫分析技术等的论著及专家述评、中医中药与放射免疫、临床实践与经验、工作报告、综述、讲座等。选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度,颇受业界和广大读者的关注和好评。

杂志详情