作者：史庆玲; 徐立新; 闫瑾; 肖琳琳taqman定量pcr转基因水稻拷贝数
摘要：[目的]采用TaqMan定量PCR技术检测水稻中外源基因含量。[方法]采用TaqMan定量PCR技术以编码磷脂酶D基因PLD为内标准基因,检测转基因水稻中外源TT51-1的含量。利用DNA梯度稀释法分别求内标准基因PLD和TT51-1的Ct值与拷贝数对数值的标准曲线方程,并将得到的Ct值代入标准曲线方程求取样品中外源基因的拷贝数。[结果]内标准基因PLD标准曲线方程为y=-3.403x＋39.939,R^2=0.993;TT51-1基因标准曲线方程为y=-3.35x＋37.37,R^2=0.991,转基因含量为1.21%,不确定度为0.45。[结论]TaqMan定量PCR技术可以用于确定转基因作物外源基因含量。
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